上海創(chuàng)建大規(guī)模細(xì)胞DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)平臺

【?2005-08-11 發(fā)布?】　美迪醫(yī)訊

上海交通大學(xué)腫瘤研究所等單位的科研人員經(jīng)過多年攻關(guān)，創(chuàng)建了大規(guī)模細(xì)胞DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)平臺，通過該平臺可直接篩出具有影響細(xì)胞生長、腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān)基因，具有重要的潛在的應(yīng)用與開發(fā)價值。該研究日前獲得2004年上海市科技進(jìn)步一等獎。

該研究項目為上海市科委發(fā)展基金重點項目，由上海交通大學(xué)腫瘤研究所、上海市腫瘤研究所癌基因及相關(guān)基因國家重點實驗室和中科院上海生命科學(xué)院上海生物工程研究中心的顧健人院士、楊勝利院士、萬大方研究員及龔毅研究員等共同完成。該研究創(chuàng)建了大規(guī)模細(xì)胞DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)平臺，以人胎盤、胎兒及肝組織cDNA文庫為材料，以人肝癌細(xì)胞SMMC－7721及小鼠NIH／3T3成纖維細(xì)胞為對象，以促進(jìn)和抑制細(xì)胞克隆形成率及細(xì)胞灶形成率為指標(biāo)，在基因組水平克隆篩選出對細(xì)胞生長有促進(jìn)／抑制作用的基因，然后測序，進(jìn)行生物信息學(xué)分析，最后確定其屬性，同時建立了各種細(xì)胞芯片的技術(shù)平臺。

研究中，在人胎盤、胎兒及肝組織三種cDNA文庫鋪板共15萬個cDNA克隆，應(yīng)用自行設(shè)計的"自身雜交"的負(fù)篩選技術(shù)，挑選出相對低豐度的克隆3萬個，分別對肝癌細(xì)胞進(jìn)行了29910個cDNA轉(zhuǎn)染，對NIH／3T3細(xì)胞進(jìn)行了22926個cDNA轉(zhuǎn)染，共選出對細(xì)胞具有促進(jìn)或抑制生長作用的基因3814個（8251個克隆），其中2836個（6958個克隆）屬已知基因，372個（384個克隆）為新基因，待確定的序列598個（895個克隆）。

據(jù)悉，對具有促進(jìn)或抑制細(xì)胞生長功能的372個新基因和新技術(shù)平臺，已申請48項，至今已獲國家34項（256個基因）。獲得具有血清學(xué)診斷前景的候選基因兩個、藥靶候選基因兩個、促進(jìn)血管新生基因1個、基因治療用候選基因3個。

本文關(guān)鍵字: 細(xì)胞DNA

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